石油降解细菌的疏散提纯及应用

揭晓时间：2023-11-02 13:09

随着石油工业的生长，陪同着含油放弃物爆发量增添，污染规模和水平也日益加重重，对其举行治理有着主要的现实意义。80年月以来，污染土壤的生物修复手艺获得快速生长。由于情形影响小、操作简朴、用度可控的特点，在土壤油污染领域获得推广运用。土壤中普遍漫衍着可降解石油的微生物种群,在土壤生物修复中有着主要作用，可是数目上相差很大。土壤中降解石油微生物的数目与污染物的保存有着亲近关系。它们能够顺应情形,然后举行选择性富集并爆发遗传改变，从而导致烃类降解细菌所占比例及编码降解烃类基因的质粒数目增添。有报道指出，降解烃类的微生物一样平常只占微生物群落总数的不到1 %，而当有石油污染物保存时,降解烃类微生物的比例可增添到10 %。微生物的这种差别污染水平、差别类型的污染中的自我顺应和滋生能力对修复土壤提供了响应处置惩罚手段，研究效果为含油放弃物的土壤异位生物修复手艺的适用化提供了试验依据。
　　优质石油降解细菌的作育筛选要领
　　菌种的收罗：被石油污染的土壤中的细菌
　　作育基：NH4NO3 2g ， K2HPO4 1. 5g， KH2 PO4 3g，MgSO4·70H2O 0. 1g，无水CaCl2 0. 01g，Na2 EDTA·2H2O 0. 01g，原油1g，蒸馏水: 1000mL， pH值7. 2～7. 4.
　　操作要领（即石油降解菌的富集、疏散、纯化）：取一定量的石油污染土样接入装有100mL 作育基的250mL 三角瓶中，于30℃、160 rmin- 1条件下在摇床中作育7d，然后取一定量的上述作育液接入装有100 mL新鲜作育基的250mL三角瓶中， 30℃、160 r·min- 1条件下摇床中作育7d;云云共3次。用接种环沾取富集作育液于平板上划线，经由多次划线纯化后，将纯化菌株于试管斜面作育后生涯于冰箱。石油降解菌的复筛：称取含油土样50g，溶于经灭菌的作育基100mL 中，配成泥浆，盛于250mL 的三角瓶中，在无菌条件下，将制好的菌悬液接种2mL于三角瓶中，各菌种均做3个平行样，并作加氯化汞杀菌和不加菌2种空缺比照。在30℃、160 r·min- 1条件下于摇床中作育。每2d取1次样，测其石油烃含量,直至其石油烃含量不再有显着转变，筛选出石油烃降解率高的菌种。接种量影响试验的操作要领可参照菌种复筛的要领。差别的是改变接种量和试验土样。样点1、样点2、样点3、样点4的泥浆中石油烃浓度划分为125mg·L - 1、56 mg·L - 1、3245mg·L - 1、209 mg·L – 1。石油降解菌的生物修复：称取含油土样2kg于圆形瓷盆中，将斜面作育的细菌举行活化，与锯末(1∶7,质量比)制成固体作育基，接入石油污染土壤中。土壤含水率基本坚持在20%左右,在自然温度下举行修复。
实验的基本效果
　　1、高效降油菌的筛�。�
　　为了取得高效、彻底的生物修复效果,疏散和筛选污染物的高效降解菌种是生物修复的一定要求。试样经由3次富集作育以及疏散纯化等办法获得多个单菌株。在此基础上,接纳降解石油试验，复筛出7株对石油具有较高降解能力的菌株。细菌密度可达107 ～109个·mL - 1 ，株菌可以使用石油为唯一碳源生长。作育7d后的生物除油率为43. 8%～58. 9% ，高于一样平常石油降解菌对石油类的降解率（ 25. 8% ～32. 8% ）对所筛选的7株菌举行心理生化试验批注，这可能是由于革兰氏阴性菌细胞外层是脂多糖,而脂多糖是由脂类和多糖组成的复合物，可以为细胞提供一个既亲水又亲油的两亲分子层，这一方面使其细胞与油滴外貌接触，使石油烃易于进入细胞，另一方面，它能降低水- 油界面张力，使原油变为由细小油滴组成的乳剂，并扩散进入细胞,加速油的降。
　　2、高效降油菌对石油的降解能力试验中设置了加氯化汞杀菌比照试验和不加菌的空缺比照试样。
　　实验批注，加氯化汞的杀菌试样石油烃降解率为9%的水平，随着降解时间的延伸石油烃降解率基本稳固，最高为12%。加氯化汞杀菌试样中石油烃镌汰的主要原由于石油烃挥发和空气氧化的作用。不加菌和氯化汞比照试样2d后的降解率为11% ，降解率随时间的延伸逐渐增添，降解8d后37%的石油烃被去除，与氯化汞杀菌试样相比有25%的石油烃是在土壤自己保存的微生物的作用下去除。接种上述提存后的菌种的试样在2d后即最先体现较强的降解能力，其降解率抵达50%左右。与不加菌比照试样相比37%左右的石油烃是被高效菌降解使用，批注疏散获得的株菌能很快顺应情形施展高效除油能力。且加菌试样的石油烃降解率曲线转变趋势基本一致，降解率随着降解时间的延伸逐渐增添。泥浆为微生物生长提供了优异的情形，降解8d后加菌试样的降解率均抵达80%左右，远高于不加菌试样的降解（37%）。
　　3、高效降油菌细胞平均降解速率
　　研究批注，高效降油菌接种量对是对差别土壤除油率影响的主要因素。实验批注接种菌液量越大，石油菌的数目越多。通过增大接种量可以提高土壤中石油菌的数目，同时高的接种量有利于石油烃的降解。除油率随着接种量的增添而增大，批注高的接种量可以增强接种菌与土著微生物的竞争能力，使接种菌迅速顺应情形，大宗滋生，施展高效降解能力。
　　4、高效降油菌对石油污染土壤的生物修复试验研究
　　凭证海内外大宗的研究报道，许多情形因素均对接种高效降油菌的除油效果爆发影响。实验中批注，没有投加任何细菌的石油土壤中的石油基本上没有降解，而一样平常含有降解细菌的石油土壤的降解率是37%，而含有较强的降解率的石油细菌则较高，约85%。即：投加高效菌株可在较短的时间内将土壤中的石油污染物去除�？杉岢滞寥乐薪细叩慕涤途渴鞘迪稚镄薷吹囊�。
　　5、石油降解菌在情形领域的应用
　　针对油田含油污水这种难降解处置惩罚的工业废水，高效原油降解菌和生物处置惩罚修建物相团结的生物深度处置惩罚手艺应该是海内油田采出水处置惩罚手艺生长的趋势。
　　曝气生物滤池组合工艺法：曝气生物滤池处置惩罚污水的原理是反应器内填料上所附生物膜中微生物氧化剖析作用，填料及生物膜的吸附阻留作用和沿水流偏向形成的食物链分级捕食作用以及生物膜内部微情形和厌氧段的反硝化作用，从而除去水中的油类物质。
　　MBR —BAF 法（膜生物反应器—曝气生物滤池）：膜生物反应器作为一种新兴高效的污水处置惩罚手艺已引起了海内外水处置惩罚界的高度重视，它实现了超滤膜的高效过滤和高浓度活性污泥生物降解的有机团结，并且不需要二沉池和污泥回流系统,在运行本钱、能耗以及处置惩罚效果等方面均具有优势。田慧颖等接纳MBR —BAF 系统处置惩罚辽河油田的采油污水,系统对采油污水中的油、BOD5 、氨氮去除效果很好，去除率均可抵达90 %左右，COD 的平均去除率也可抵达70 %以上，出水清亮透明,无异味。
　　含油泥砂生物法处置惩罚：含油泥砂是油田开发历程中难以阻止，是主要的情形污染源之一，油泥砂含有大宗原油，对周围的大气、水质和土壤会造成严重的污染，生物处置惩罚法使用微生物将泥砂中的原油污染物降解为CO2和H2O ，剖析产品无二次污染。微生物具有漫衍普遍、种群数目多、代谢类型多种多样、顺应情形突变能力强的特点，在任何保存污染物的地方都会泛起响应的可降解污染物的微生物,使用经由驯化、筛选、诱变或基因重组等获得的高效降解菌种来处置惩罚污染物，与物理化学要领相比，具有易于治理、清静、无二次污染等优点，因此在海内外获得鼎力大举推广运用。

上一篇水处置惩罚清力杀菌剂

下一篇湿法脱硫引起的浆液恶化中毒的缘故原由剖析及处置惩罚步伐

分享到：

地点：湖北省鄂州市葛店开发区润阳路26号

电话：027-56929228

邮箱：hubeihaili@haili-hb.com

联系方法

首页